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结晶紫染色液

简要描述:

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。

更新时间:2019-03-30

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革兰染色液使用说明书

【产品名称】通用名称:革兰染色液

            产品型号:JRBGL4S

【包装规格】每种染色液的包装规格为每瓶50 ml、100ml250ml500ml,整组染色液的包装规格为:4×50ml、4×100ml4×250ml4×500ml

【预期用途】用于细菌或真菌的涂片染色。

【检测原理】革兰阳性菌的细胞壁有一层比革兰阴性菌厚的肽聚糖,能与结晶紫紧密结合,不容易被脱色液洗掉,在此基础上形成了革兰染色液试剂。

【主要成成

主要

主要成分

规格

数量

50ml

4×100ml

4×250ml

500ml

结晶紫染色液(A液)

结晶紫

50ml/瓶

100ml/瓶

250ml/瓶

500ml/瓶

1瓶

碘液(B液)

碘、碘化钾

50ml/瓶

100ml/瓶

250ml/瓶

500ml/瓶

1瓶

95%乙醇溶液(C液)

乙醇

50ml/瓶

100ml/瓶

250ml/瓶

500ml/瓶

1瓶

番红染色液(D液)

番红

50ml/瓶

100ml/瓶

250ml/瓶

500ml/瓶

1瓶

 

【储存条件及有效期】

1、原包装未开封染色液的有效期为12个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。

2、储存条件:本试剂应贮存在相对湿度不大于80%,无腐蚀性气体和通风良好的10℃~30℃常温环境。

3、生产日期和失效日期:详见外包装标签。

【样本要求】待检标本应为菌株或有菌株的标本。

【检验方法】

1。涂片

取一洁净载玻片,滴一小滴生理盐水于玻片中央,按无菌操作要求,先用接种环,挑取少量某菌培养物于玻片中央水滴中,涂布均匀。要求涂片薄且均匀,使其自然干燥。

2.固定

菌液涂片干燥后通过火焰 1-2 次即可,不可过热,以载玻片不烫手为宜。

3。染色

一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:

1初染:滴加结晶紫染色液(A液)覆盖玻片涂布区,染色1分钟,水洗。

2媒染:滴加(B液)碘液后染色1分钟,水洗。

3脱色:甩净载玻片上水分,倾斜玻片,并衬以白纸,用95%乙醇溶液(C液)滴洗至无紫色褪下时为宜,时间20-60s。

(4)复染:滴加蕃红染色液(D液后,染色1-2分钟,水洗。

(5)吸干或在空气中凉干后,油镜镜检。

【检验结果的解释】在显微镜下观察染色结果:

1、在显微镜下观察到紫色或深紫蓝色菌落为革兰染色阳性菌。  

2、在显微镜下观察到红色或粉红色菌落为革兰染色阴性菌。 

【检验方法的局限性】有些细菌有染色嗜变性,不一定完全是染色原因,应根据菌体形态加以确定。

【注意事项】

1、该染色液仅用于体外诊断。      

2、涂片厚薄要均匀,自然干燥后再加热固定。

3、酒精脱色过度或复染的时间不能太长,阳性菌可被误染为阴性菌;酒精脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。

4、所用标本应视为具有传染性物质。

【参考文献】

1、陈天寿。《微生物培养基的制造与应用》。中国农业出版社。1995年版;

2、王钦生等.《实用医学培养基手册》. 人民军医出版社.1999年版; 

3、马绪荣等。《药品微生物学检验手册》。科学出版社。2001年版。

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